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甲狀腺素放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)，操作方法！

甲狀腺素是細(xì)胞的產(chǎn)物，為灰白色針狀結(jié)晶。Mp231-233℃(分解)。溶于氫氧化堿或碳酸堿溶液，不溶于水、乙醇和其他有機(jī)溶劑，但溶于無(wú)機(jī)酸或堿的乙醇溶液中。

[使用目的]

用于定量測(cè)定人血清（或血漿）中甲狀腺素（T4）的濃度。

[用途]

甲狀腺素（T4）和三石典甲狀腺原氨酸（T3），二者均為酪氨酸的石典化物，由甲狀腺分泌。其中 T4在外周脫石典后，約 2／5 轉(zhuǎn)化為 T3（T3），3／5 轉(zhuǎn)化為反 T3（r T3），這一過(guò)程是在肝內(nèi)完成的。肝細(xì)胞的微粒體和胞漿膜內(nèi)存在石典化甲狀腺素脫石典酶，其中 5ˊ－脫石典酶催化 T4分解為高能的 T3, 5－脫石典酶催化 T4分解為無(wú)活性的 rT3。在肝細(xì)胞內(nèi)，甲狀腺激素分布于細(xì)胞核、線粒體、微粒體和可溶性成分中，在這些部分中其含量水平的高低變化依次為：可溶性成分﹥微粒體﹥線粒體﹥細(xì)胞核，且 T4﹥T3。肝臟是甲狀腺素代謝、滅活的主要場(chǎng)所，也是甲狀腺素結(jié)合蛋白的合成部位，該結(jié)合蛋白可與
血清蛋白競(jìng)爭(zhēng)性攝取甲狀腺素，是肝臟攝取甲狀腺素的主要因素。血清中，甲狀腺素絕大部分與蛋白質(zhì)結(jié)合，僅極少部分呈游離型，游離型甲狀腺素的多少與肝臟對(duì)甲狀腺素的攝取量成正比。肝硬化時(shí)，甲狀腺素的代謝將必然受到影響。定量測(cè)定總 T4含量，對(duì)評(píng)價(jià)甲狀腺功能狀態(tài)具有重要意義。

[實(shí)驗(yàn)方法]

1、將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫，平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作；

2、取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào)，所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù)；

3、取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本 50µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中；

4、每管均各加入 200µl 標(biāo)記物工作液；

5、除去 T、NSB 管以外的各管均各加入 200µl 抗體工作液，充分混勻；

6、37℃溫育 45 分鐘；

7、每管均各加入 500µl 分離劑后，充分混勻；

8、室溫放置 10~15 分鐘后，離心 3500 轉(zhuǎn)／分，20 分鐘后，吸去或傾倒掉上清液；

9、用 γ-計(jì)數(shù)器測(cè)定各管放射性計(jì)數(shù)（CPM）。 推薦檢測(cè)時(shí)間: 1 分鐘

10、從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。

甲狀腺素放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)，操作方法！