1．基本原理先將標(biāo)準(zhǔn)物或血樣品與抗血清混勻，免疫反應(yīng)6～24h，使抗原與抗體充分結(jié)合，甚至達(dá)到平衡，然后再加入標(biāo)記抗原，與抗體反應(yīng)12～24h，zui后分離B與F，這稱(chēng)為順序飽和分析法。
應(yīng)用順序飽和加樣，可以提高測(cè)定方法的靈敏度。Utiger在做人促甲狀腺激素（TSH）放射免疫分析時(shí)，將標(biāo)記物延至第2天加入，發(fā)現(xiàn)其靈敏度增加兩倍。如果縮短zui后的溫育時(shí)間，仍可取得滿(mǎn)意的結(jié)果。所以一般認(rèn)為，在順序飽和加樣中，第1次溫育時(shí)間可以長(zhǎng)，而第2次溫育時(shí)間要短，這樣可以提高靈敏度。但也有相反的意見(jiàn)，認(rèn)為順序飽和加樣，是使用過(guò)量抗體，會(huì)使靈敏度受到一定影響。如果使用抗體不過(guò)量，溫育時(shí)間縮短，在抗原和抗體結(jié)合未達(dá)到平衡飽和時(shí)就加入標(biāo)記物，這樣既不影響加靈敏度，反而比較穩(wěn)定，甚至可提高靈敏度。
2．加樣程序 以人血漿精安酸加壓素RIA測(cè)定程序?yàn)槔ㄖ苯訙y(cè)定）。
（1）加樣（單位μl；總反應(yīng)體積600μl）
?。?）孵育：4℃，24h。
（3）分離B與F。
無(wú)肽血漿，用于血漿的直接測(cè)定。其制備方法為：在電磁攪拌下，抽取2%加膜活性炭溶液5ml，共兩管，離心、去上清。血漿5ml，倒入上述活性炭管中，加蓋，充分振蕩10min，離心，上清倒入上述另一活性炭管中，振蕩10min，再離心，取上清，即無(wú)肽血漿。血漿中的生物活性物質(zhì)被活性炭吸附而去除。
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