小鼠層粘蛋白(LN)elisa試劑盒的基本信息
層粘連蛋白又稱板層素其分子量為805kD，由一個(gè)400kD的α鏈和兩條200kD左右的β鏈組成。它是構(gòu)成細(xì)胞間質(zhì)的一種非膠原糖，在肝內(nèi)主要由內(nèi)皮細(xì)胞及貯脂細(xì)胞合成，與膠原一起構(gòu)成基底膜的成分。其生物功能是細(xì)胞黏著于基質(zhì)的介質(zhì)，并與多種基底膜成分結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和分化。
小鼠層粘蛋白(LN)elisa試劑盒操作方法簡介
實(shí)驗(yàn)開始前，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?，試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同生物素標(biāo)記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
購買我司elisa試劑盒可以提供免費(fèi)代測服務(wù)，客戶準(zhǔn)備好樣本，上海和南京地區(qū)的客戶可以提供免費(fèi)上門取樣服務(wù)。其他地區(qū)的客戶，樣本用泡沫箱子包好，放干冰或者冰袋寄送給我們。代測時(shí)間為5到7個(gè)工作日提供原始數(shù)據(jù)，分析數(shù)據(jù)， 實(shí)驗(yàn)操作步驟以及實(shí)驗(yàn)所用儀器。
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